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1，定性分析的依据：紫外光波长具有一定的范围，不同的物质最大吸收波长不一样，比如甲物质在紫外的a和b波长处有吸收现象，而且在a处达到最大吸收，则甲物质的紫外最大吸收波长是a。不同的物质的这种波长不一样。
2，定量分析依据：根据朗伯-比尔定律，物质浓度和吸收波长的强度成正比关系。
紫外-可见分光光度法是在190～800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。
当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。
扩展资料：
紫外分光光度计注意事项：
1，开机前将样品室内的干燥剂取出，仪器自检过程中禁止打开样品室盖。
2，比色皿内溶液以皿高的2/3～4/5为宜，不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。测定时应保持比色皿清洁，池壁上液滴应用擦镜纸擦干，切勿用手捏透光面。测定紫外波长时，需选用石英比色皿。
3，测定时，禁止将试剂或液体物质放在仪器的表面上，如有溶液溢出或其它原因将样品槽弄脏，要尽可能及时清理干净。
4，实验结束后将比色皿中的溶液倒尽，然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净，倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内，盖上防尘罩，做好使用登记，得到管理老师认可方可离开。
百度百科-紫外-可见分光光度法
百度百科-朗伯比尔定律
紫外可见分光光度法与荧光光度法的区别
A260nm是核酸最高吸收峰的吸收波长，最佳测量值的范围为0.1至1.0。如果不在此范围，稀释或浓缩样品，使之在此范围内;
如果吸光度小于0.05，检查是否存在操作因素(如移液不准确，样品内有悬浮物等)影响。DNA样品的A260 吸光度值是否>0.1。
(请注意，这个值跟仪器无关，核酸的吸光度必需大于0.1，其值才有效和可靠，因为样品中的杂质和颗粒这些不纯物的干扰通常会对光有一定吸收，其值<0.1)。
A230产生负值主要是由于在很低 DNA 浓度的溶液中的一些其他成分的干扰所导致的。在下一个测定中，需要降低样品的稀释度，A230的负值会被校正。
A260/A280比值可进行核酸样品纯度评估：纯DNA的A260/A280比值为1.8，纯 RNA的A260/A280比值为2.0。如果比值低，表示受到蛋白（芳香族）或酚类物质的污染，需要纯化样品。
A260/A230比值可进行核酸样品纯度评估：纯 DNA和RNA的A260/A230比值为 1.8 – 2.2。若比值小于1.8表明样品被碳水化合物（糖类）、盐类或有机溶剂污染，需要纯化样品。当 260/230<1 时，通常只有两种情况。一是胍盐污染，二是蛋白污染。扩展资料：
当我们获得了Micro Drop超微量分光光度计检测结果后，对光谱的正确分析至关重要。
输出结果的含义：
1. A260nm——核酸zui高吸收峰的吸收波长。
2. A280nm——蛋白zui高吸收峰的吸收波长。
3. A230nm——是碳水化合物zui高吸收峰的吸收波长。
4. A340nm——是基线校准波长，为检测溶液样品的浊度和其他干扰因子。该值应该接近0.0。如果不是，表明溶液中有悬浮物，需要纯化样品。纯样品的A340一般是0。
百度百科 ?——脱氧核糖核酸
nanodropone测dna浓度每次相差特别大是为什么
一、指代不同
1、可见分光光度法：通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。
2、荧光光度法：根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定的方法。
二、特性不同
1、可见分光光度法：具有灵敏度高、操作简便、快速等优点，是生物化学实验中最常用的实验方法。许多物质的测定都采用分光光度法。在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与不同波长相对应的吸收强度。
2、荧光光度法：由于不同的物质其组成与结构不同，所吸收的紫外-可见光波长和发射光的波长也不同，同一种物质应具有相同的激发光谱和荧光光谱，将未知物的激发光谱和荧光光谱图的形状、位置与标准物质的光谱图进行比较，即可对其进行定性分析。
三、作用不同
1、可见分光光度法：在定量分析时，首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况（吸收光谱），从中确定最大吸收波长 ，然后以此波长 的光为光源（单色光），进行吸光度A的测定，是朗伯比尔定律用于定量分析的首要条件。
2、荧光光度法：测量物质的荧光强度可对其进行定量测定。荧光分析法的特点是灵敏度高、选择性好、样品用量少和操作简便。
百度百科-荧光分光光度法
百度百科-分光光度法
nanodrop是基于吸光值来计算核酸浓度。nanodropone是一种超微量分光光度计，在进行测dna时，出现浓度相差大的情况，是因为nanodrop是基于吸光值来计算核酸浓度，当核酸里面有污染时，浓度就会相差很大。
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